细胞全称：EBV转化淋巴细胞系（EBV transformed lymphocyte line；AKATA）

一、细胞简介

AKATA细胞系源自一名日本伯基特淋巴瘤患者的肿瘤组织，是可稳定产生爱泼斯坦-巴尔病毒（EBV）的经典淋巴细胞模型，也可命名为Akata EC。该细胞系广泛应用于EB病毒致病机制、淋巴瘤发生发展、病毒宿主互作、抗肿瘤药物筛选等科研实验。

二、细胞基本特性

1. 组织来源：人淋巴瘤组织

2. 细胞形态：淋巴母细胞样，悬浮生长，无贴壁特性

3. 细胞含量：单支细胞数量＞1×10⁶ 个

4. 产品规格：T25 培养瓶活细胞、1mL 冻存管细胞

5. 适用范围：仅限实验室科学研究使用

三、运输与保存条件

1. 冻存管细胞（1mL，干冰运输）

全程干冰低温运输。细胞签收后可置于 -80℃冰箱静置过夜，次日转入液氮罐中长期保存，也可直接复苏培养。若收到产品存在干冰完全挥发、冻存管破损、瓶盖脱落、细胞污染、液体浑浊等异常情况，需立即联系售后处理。

2. T25 活细胞（常温运输）

常温鲜活发货，签收后严格按照细胞接收规范进行处理，稳定细胞生长状态。

四、细胞接收后标准处理流程

1. 细胞签收后，使用75%医用酒精对培养瓶外壁进行全面消毒，将 T25 培养瓶置于 37℃ 细胞培养箱静置平衡 2–3 h。若发现培养瓶破损、培养液渗漏、细胞污染等问题，需拍照留存证据并及时反馈售后。

2. 采用4×、5×低倍显微镜观察细胞整体状态，并分别采集10×、20×镜下细胞视野照片各2–3张，同时留存培养瓶外观照片，作为售后核验的原始依据。

3. 悬浮细胞专属处理：细胞静置平衡2–3h后，收集瓶内全部细胞悬液，1000 RPM离心5 min，弃除上层运输培养液，使用新鲜配制的完全培养基重悬细胞，转接至全新培养瓶中正常培养。

重要备注：运输所用原装培养液成分不稳定，不可继续用于细胞培养，必须更换新鲜配制的完全培养基；细胞首次传代建议按照1:2比例分瓶培养，保障细胞增殖活性。

五、培养体系与冻存条件

1. 完全培养基配比

基础培养基：RPMI-1640 培养基；添加 10% 优质胎牛血清（FBS）、1% 双抗（青霉素-链霉素）。

2. 标准培养环境

培养温度：37℃；气相环境：95% 空气 + 5% CO₂；培养箱湿度：70%–80%。

3. 细胞冻存液

现配现用，配比为 90% 优质胎牛血清 + 10% DMSO。

六、标准实验操作流程

1. 冻存细胞复苏

将1mL细胞冻存悬液置于37℃水浴中快速晃动解冻，完全融化后转移至含4–6 mL完全培养基的离心管中充分混匀。1000 RPM 离心 3–5 min，弃去上清液，用新鲜完全培养基重悬细胞沉淀。将细胞悬液转移至培养瓶内，补加6–8 mL完全培养基，于37℃培养箱中静置过夜，次日显微镜下观察细胞活性、贴壁及生长密度情况。

2. 细胞传代培养

当细胞培养密度达到80%–90%时，即可开展传代处理。AKATA为悬浮生长细胞，无需胰酶消化，具体操作如下：

（1）收集培养瓶内全部细胞悬液至离心管中，1000 RPM 离心 5 min，弃除上清培养液；

（2）加入1–2 mL新鲜完全培养基轻柔重悬细胞沉淀，充分混匀；

（3）首次传代按1:2比例分瓶，后续可根据细胞增殖状态调整为1:2~1:5比例分瓶，每支新T25培养瓶补加6–8 mL新鲜完全培养基；

（4）常规培养维持细胞密度在1×10⁵~1×10⁶ 个/mL，可有效保障细胞稳定增殖、维持良好生长活性。

3. 细胞冻存保种

建议细胞传代至3代以内完成种子细胞冻存，规避细胞性状变异、活性下降问题，保障后续实验稳定性，以T25培养瓶为例：

（1）收集对数生长期的悬浮细胞至离心管中，采用血球计数板统计活细胞数量；

（2）1000 RPM 离心 3–5 min，弃除上清液，使用现配冻存液重悬细胞，调整细胞密度至 1×10⁶~1×10⁷ 个/mL，分装至无菌冻存管；

（3）清晰标注细胞名称、传代代数、冻存日期等信息，将冻存管放入程序降温盒，置于 -80℃冰箱过夜梯度降温，次日转移至液氮罐中长期保存，并登记存放位置以便后续快速取用。

七、安全操作规范

1. 本细胞属于具有潜在生物危害性的实验材料，所有操作必须在二级生物安全柜内进行，实验全程穿戴防护服、手套等防护用具；所有接触过细胞的废液、耗材需经高压灭菌处理后方可丢弃，杜绝生物安全风险。

2. 复苏液氮冻存细胞时，需全程佩戴防冻手套、实验防护服及防护面罩。冻存管长期浸没于液氮中易渗入液氮，解冻过程中液氮快速气化，易引发冻存管胀裂、瓶盖弹开及碎屑飞溅，存在安全隐患，需严格规范操作、做好全套防护。

八、使用范围声明

本产品仅适用于实验室科学研究，严禁用于动物或人体疾病临床治疗、活体给药、临床诊断及相关医疗用途。

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