细胞全称：人胃腺癌细胞（Human Gastric Adenocarcinoma Cells, AGS）

一、细胞简介

AGS 细胞株取自未经临床治疗的人胃癌手术肿瘤组织块，为经典的人胃腺癌体外研究模型，广泛应用于胃癌发病机制、药物筛选、肿瘤增殖与侵袭等相关科研实验。

二、细胞基本特性

1. 组织来源：人胃腺癌组织

2. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁依赖性生长

三、运输与保存条件

1. 冻存管细胞（1mL，干冰运输）

全程干冰低温运输。细胞签收后可置于 -80℃冰箱静置过夜，次日转入液氮罐中长期保存，也可直接复苏培养。若收到产品存在干冰完全挥发、冻存管破损、瓶盖脱落、细胞污染、液体浑浊等异常情况，需立即联系售后处理。

2. T25 活细胞（常温运输）

常温鲜活发货，签收后严格按照细胞接收规范进行处理，稳定细胞生长状态。

四、细胞接收后标准处理流程

1. 细胞签收后，使用75%医用酒精对培养瓶外壁进行全面消毒，将 T25 培养瓶置于 37℃ 细胞培养箱静置平衡 2–3 h。若发现培养瓶破损、培养液渗漏、细胞污染等问题，需拍照留存证据并及时反馈售后。

2. 采用4×、5×低倍显微镜观察细胞整体状态，并分别采集10×、20×镜下细胞视野照片各2–3张，同时留存培养瓶外观照片，作为售后核验的原始依据。

3. 细胞静置稳定后，镜下观察细胞贴壁及生长密度：

若细胞密度＜60%，弃除瓶内原装运输培养液，收集悬浮脱落细胞进行离心回收，重悬后回加原培养瓶，更换6–8 mL新鲜完全培养基，置于培养箱中继续培养；若细胞密度达70%–80%，可直接开展传代操作，运输过程中脱落的悬浮细胞均需离心回收合并培养。

重要备注：运输所用原装培养液不可继续用于细胞培养，需更换新鲜配制的完全培养基；细胞首次传代建议按照1:2比例分瓶培养。

五、培养体系与冻存条件

1. 完全培养基配比

基础培养基：F12K 培养基；添加 10% 优质胎牛血清（FBS）、1% 双抗（青霉素-链霉素）。

2. 标准培养环境

培养温度：37℃；气相环境：95% 空气 + 5% CO₂；培养箱湿度：70%–80%。

3. 细胞冻存液

现配现用，配比为 90% 优质胎牛血清 + 10% DMSO。

六、标准实验操作流程

1. 冻存细胞复苏

将1mL细胞冻存悬液置于37℃水浴中快速晃动解冻，完全融化后转移至含4–6 mL完全培养基的离心管中充分混匀。1000 RPM 离心 3–5 min，弃去上清液，用新鲜完全培养基重悬细胞沉淀。将细胞悬液转移至培养瓶内，补加6–8 mL完全培养基，于37℃培养箱中静置过夜，次日显微镜下观察细胞贴壁及生长状态。

2. 细胞传代培养

当细胞汇合度达到80%–90%时，即可进行传代处理，具体操作如下：

（1）弃除培养瓶内旧培养液，采用无钙、无镁 PBS 轻柔润洗细胞1–2次，去除残留血清与代谢杂质；

（2）T25培养瓶加入1–2 mL 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA消化液，置于37℃培养箱消化1–2 min，镜下观察至大部分细胞变圆、脱离瓶壁后，立即加入3–4 mL含10%胎牛血清的培养基终止消化；

（3）轻柔吹打瓶壁细胞使其完全脱落，收集细胞悬液，1000 RPM 离心 3–5 min，弃上清后加入新鲜培养基重悬细胞；

（4）按照1:2比例进行首次分瓶传代，常规培养可根据细胞生长速率调整为1:2~1:5比例，每瓶补加6–8 mL新鲜完全培养基正常培养。

3. 细胞冻存保种

建议细胞传代至3代以内完成种子细胞冻存，保障细胞活性与性状稳定，以T25培养瓶为例：

（1）按照传代流程消化、收集细胞，采用血球计数板统计活细胞数量；

（2）1000 RPM 离心 3–5 min，弃除上清液，使用现配冻存液重悬细胞，调整细胞密度至 1×10⁶~1×10⁷ 个/mL，分装至冻存管；

（3）清晰标注细胞名称、传代代数、冻存日期等信息，将冻存管放入程序降温盒，置于 -80℃冰箱过夜梯度降温，次日转移至液氮罐中长期保存，并登记存放位置以便后续取用。

七、安全操作规范

1. 本细胞属于具有潜在生物危害性的实验材料，所有操作必须在二级生物安全柜内进行，实验全程穿戴防护服、手套等防护用具；所有接触过细胞的废液、耗材需经高压灭菌处理后方可丢弃。

2. 复苏液氮冻存细胞时，需佩戴防冻手套及防护面罩。冻存管长期置于液氮中可能渗入液氮，解冻过程中液氮快速气化易引发管体胀裂、喷溅，存在安全风险，需规范操作、做好防护。

八、使用范围声明

本产品仅适用于实验室科学研究，严禁用于动物或人体疾病临床治疗、活体给药、临床诊断及相关医疗用途。

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